USP<1469>亞硝胺雜質(zhì)通則確定應(yīng)在藥品中檢測的六種亞硝胺包括:(NDMA)、N-亞硝基二乙胺(NDEA)、N-亞硝基二異丙胺(NDIPA)、N-亞硝基乙基異丙胺(NEIPA)、N-亞硝基二丁胺(NDBA)和N-亞硝基甲基氨基丁酸(NMBA)，并且提出了四種分析方法，包括:LC-HRMS、 HS+GC-MS/MS、 LC-MS/MS和GC-MS/MS方法，生產(chǎn)商可以使用這些方法來檢測產(chǎn)品中是否存在亞硝胺雜質(zhì)。

專為客戶解決分析領(lǐng)域各種疑難雜癥的艾思吉老師，看到USP<1469>通則發(fā)布，主動請纓做個“吃螃蟹"的人，重現(xiàn)通則，希望通過實際實驗提前將可能遇到的問題排查。不出所料，難點重重，好在都被機(jī)智的艾思吉老師逐一攻克了。欣喜之余，艾思吉老師也想把新鮮出爐的解決方案和各位粉絲共同分享。

難點1：NDMA假陽性一柱搞定

由于NDMA和DMF的同位素的M/Z相近，且MS2掃描圖有m/z接近的碎片，在三重四極桿質(zhì)譜上難以區(qū)分，而常規(guī)色譜柱又難以分離NDMA和DMF，所以常規(guī)解決方案是選用分辨率更高的儀器進(jìn)行鑒定，比如Q-TOF。

然而，如果能用一支色譜柱去解決DMF干擾造成的NDMA假陽性的問題，降本又高效，何樂而不為呢？

艾思吉老師收集了實驗室里各種寶貝色譜柱，并逐一測試，鍥而不舍，最終篩選出了一支“神柱"-基毒專用柱（ShimNex S-GTIs，3 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01247-31），終于把“形影不離"的NDMA和DMF“拆散"了！

難點2：同分異構(gòu)體的分離，還是那支“神柱"

對于NMBA及NEIPA的順反異構(gòu)體可以將峰面積分別合并計算，但對于NDPA和NDIPA、NDBA和NDIBA這兩組同分異構(gòu)體，若同時檢測需要分開計算。常規(guī)的色譜柱很難實現(xiàn)異構(gòu)體的分離，而質(zhì)譜端M/Z相同，無法區(qū)分。

艾思吉老師又把這支“神柱"（ShimNex S-GTIs，3 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01247-31）應(yīng)用到了兩組異構(gòu)體的分離，果然是“神柱"，真的分開了！

難點3：NDMA靈敏度不夠，有訣竅

難點4：離子通道干擾，有神器

NDBA、NDIBA、NEPhA等離子通道容易有干擾，影響雜質(zhì)的準(zhǔn)確定量，可以通過安裝鬼峰捕集小柱Ghost Trap（PN：228-59921-92）排除干擾。

空針-連Gost trap DS 7.6*30mm（PN：228-59921-92）

空針-不連接Gost trap

空針-連Gost trap DS 7.6*30mm（PN：228-59921-92）

難點5：更多亞硝胺雜質(zhì)的篩查，塞查包

雖然USP規(guī)定了6種亞硝胺雜質(zhì)，但艾思吉老師希望通過建立一個篩查方法，實現(xiàn)更多種亞硝胺雜質(zhì)的監(jiān)測，最終建立了包括但不限于USP以及EP規(guī)定的共計13種亞硝胺雜質(zhì)的篩查方案。

*黃色標(biāo)記為USP規(guī)定的6種亞硝胺雜質(zhì)